Сиырдың жұқпалы ринотрахеит вирусына қарсы антиденелердің ELISA анықтау жинағы

Үлгі №: VD105E
Қысқартылған:IBRV Аб Элиза
Үлгі: сарысу

Сипаттама

Техникалық сипаттама

BVDV Аб Элиза

Мақсатты пайдалану: ЖұқпалыСиырдың ринотрахеит вирусыАнтиденені ELISA анықтау жинағы қолданыладыжұқпалы ринотрахеитті анықтауin vitro сиыр сарысуындағы вирусқа қарсы антиденелер.

Үлгі: сарысу

Берілген материалдар:

Infectious Bovine Rhinotracheitis Virus Antibody ELISA Detection Kit

Сынақ процедуралары және интерпретация

1-ҚАДАМ Сынақ процедурасы

1.1 Жуу ерітіндісін дайындау

Wшоғырлану wкүлді сұйықтық:Қолданар алдында жууға арналған ерітіндіні бөлме температурасына дейін (20-25 градус) қалпына келтіріп, біркелкі болу үшін біркелкі шайқау керек. Содан кейін концентрлі жуу ерітіндісін тазартылған сумен 20 рет сұйылтыңыз (мысалы, 5 мл концентрлі жуу ерітіндісі 95 мл тазартылған суға қосылады), жақсылап араластырыңыз, сұйылтылған жуу сұйықтығын 2-8 градус температурада 7 күн сақтауға болады.

1.2 Үлгіні дайындау

① Жануарлардың толық қаны алынды, 10 минут бойы 4000 айн/мин центрифугаланады және үстіңгі зат жиналды. Сарысуды гемолизсіз табиғи жолмен де коагуляциялауға болады.

② Сыналатын сарысуды сарысу сұйылту пластинасында 50 рет сұйылтыңыз (мысалы: 147ул үлгідегі сұйылтқышқа сыналатын 3ул сарысуды қосыңыз).

Ескерту: Теріс және оң бақылауларды сұйылту қажет емес

1.3 Сынақ процедурасы

①Microplate фермент белгісін алыңыз (үлгілер санына сәйкес, бөлшектеуге және бірнеше рет пайдалануға болады), микропластинка ферменттік жапсырмасына сұйылтылған сарысудан 100ул қосыңыз, теріс бақылау және оң бақылау үшін әрқайсысында екі ұңғыма орнатыңыз және сәйкесінше реакция ұңғымасына 100ул қосыңыз. Пластинаны жабу үшін тығыздағыш пленканы пайдаланып, ұңғымадағы үлгіні ақырын шайқаңыз және 30 минут бойы 37 градуста инкубациялаңыз.

②Тығыздағыш пластина пленкасын ашыңыз, пластинадағы ерітіндіні жақсылап шайқаңыз, әр ұңғымаға 300 мкл жұмыс концентрациясы бар жуу сұйықтығын қосыңыз, содан кейін сұйықтықты ұңғымаға тастаңыз. Жоғарыдағы қадамдарды 5 рет қайталаңыз, соңында таза сіңіргіш қағазда құрғатыңыз.

③Сұйылтылған фермент конъюгаты: Фермент конъюгатын (80×) 80 рет сұйылтыңыз (мысалы: 10ul фермент конъюгаты конъюгаты + 790ul үлгі сұйылтқыш, талап етілетін нақты мөлшер сынақ үлгілерінің санына сәйкес есептеледі), жақсылап араластырыңыз және бір жаққа қойыңыз.

④Әр ұңғымаға 100 мкл фермент конъюгаты қосып, пластинаны жабыңыз және 30 минут бойы 37 градуста инкубациялаңыз.

⑤Жуу фермент пластинасы, арнайы операция жоғарыда көрсетілгендей ②.

⑥Әр ұңғымаға 100 мкл субстрат ерітіндісін құйыңыз, пластинаны жабыңыз және жарықтан 37 градус қашықтықта 10 минут бойы инкубациялаңыз.

2-ҚАДАМ Нәтижені түсіндіру

Әрбір ұңғыманың OD450 мәні 96 шұңқырлы микропластинаны оқу құрылғысында оқылды.

2.1 Тексеру Теріс бақылаудың орташа OD450nm мәні < 0,25 болды және оң бақылаудың орташа OD450nm мәні 0,6-дан жоғары немесе оған тең болды, эксперимент нәтижелері жарамды болды. Әйтпесе, сынақты қайталау керек.

2.2 Есептеу әдісі

Әрбір үлгі үшін түзетілген үлгіні және бақылау мәндерін пайдаланып S/P мәнін келесідей есептеңіз:

product-554-49

2.3 Нәтижені түсіндіру

S/P < 0,2 болғанда, ол теріс деп бағаланады.

S/P > 0,3 болғанда, ол оң деп бағаланады.

0,2 S/P-ден аз немесе тең болғанда, 0,3-тен кем немесе тең болса, ол күдікті деп бағаланады және бір аптадан кейін сынама алуды және сынақты қайталауды ұсынады.

Ыстық тегтер: жұқпалы сиыр ринотрахеит вирусына антиденелерді анықтау жиынтығы, Қытайда жұқпалы сиыр ринотрахеит вирусына антидене элиза анықтау жинағы жеткізушілер, өндірушілер, зауыт

Алдыңғы: Сиыр вирустық диарея вирусына қарсы антиденелер Элиза жинағы

Келесі2: Аяқ-ауыз ауруларының вирусы-О Антидене Элиза жинағы